基因合成需要客戶(hù)提供質(zhì)粒。

可以，就是基因合成，只需要客戶(hù)提供抗體的重鏈和輕鏈序列就可以。

我們目前的抗體表達(dá)載體是鼠源和人源，可以合成goat，chicken或者sheep的全長(zhǎng)抗體序列裝到pTT5里進(jìn)行表達(dá)。

大概需要1-2ug即可。

有慢病毒載體:pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP和pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro.可以問(wèn)下客戶(hù)的研究目的.?如果客戶(hù)做蛋白的建議還是不要建議這兩個(gè)載體。

轉(zhuǎn)染細(xì)胞一般用flag檢測(cè)表達(dá)情況。如果有標(biāo)簽可以做WB來(lái)鑒定是否表達(dá)。用熒光載體或QPCR檢測(cè)是否轉(zhuǎn)染細(xì)胞。若質(zhì)粒沒(méi)有加熒光可以用QPCR檢測(cè)。

1、引物 更換引物嘗試，設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照（其他同載體的質(zhì)粒）和陰性對(duì)照（空載體）看是否引物問(wèn)題。
2、PCR擴(kuò)增體系 一般問(wèn)題不大，可以看下退火溫度等信息。
3、抗性是否加錯(cuò)，抗性濃度是否正常。